[VIP第1年] 指数:3
总RNA的定义：总RNA=mRNA+tRNA+rRNA，即：总RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的总和。这是在还没有发现lncRNA等microRNA的时候的概念。但是却被各大公司默认的概念，一直延续至今。所以各位可以去各大公司的网站，看一看总RNA提取试剂盒案例提供的RNA电泳图，只有表示总RNA的2条带——28s和18s；表示microRNA的5s带，要不没有，要不很弱。那么mRNA在哪里呢？从RNA电泳图上能不能看到呢？真正成熟的mRNA，主要集中在28s和18s之间和上下的荧光背景（一般每条基因mRNA量很少，所以，整体一般看不到明显带，只表现为28s和18s中间和上下的连续的涂抹带）。植物RNA提取试剂：提取的总RNA纯度极高，没有蛋白和其他杂质的污染。苏州正规RNA提取试剂厂家现货
细胞RNA提取的方法：实验提取步骤：标准Trizol提取步骤为液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--离心--加入氯丙醇沉淀--离心--酒精洗涤--离心。将细胞培养皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分钟，用泵头轻轻吹打后吸取液体放入进口EP管中。加入1/5体积的氯仿，上下混匀液体，4度静置10-15分钟。（氯仿为有机溶剂，有效的使有机相和无机相迅速分离。有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和RNA脱离，RNA进入水相）。4度离心15分钟，一定注意选择低温离心。离心后分成三层，RNA在上清里，从离心机轻轻拿出EP管，以免管内物质震荡导致下层沉淀激起。吸取上清的时候一定要动作轻柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下层沉淀，将液体置于新的EP管中。加入等体积异丙醇，4度静置10min，然后12000rpm离心10min。苏州正规RNA提取试剂能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。
植物RNA快速提取试剂盒：是一种单相RNA快速提取试剂盒，可高效裂解坚固的植物细胞并强烈压制RNA酶活性。细胞破碎之后，植物多糖立即被PlantRNAtrip独特的成分结合。离心抽提步骤将RNA与灭活的RNA酶、蛋白、基因组DNA污染分离，并清理植物多糖多酚以及次生代谢产物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚，并清理残余的多糖。提取可在60分钟内完成，所提取的RNA纯度极高，不含DNA和多糖和多酚污染，可用于构建cDNA文库、RT-PCR、Northern转印分析、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译、和RNA酶保护实验。适于各种植物组织RNA提取，也特别适合富含糖原的动物肝脏和肌肉组织提取高纯度RNA。如果植物组织富含多酚和次生代谢产物，推荐使用PlantRNAExtractionkit(R1050)。
石蜡包埋组织RNA快速提取试剂盒（离心柱型）：原理简介：改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA（RNA）从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板。
细胞RNA提取的方法：异丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以见到侧壁沉淀，轻轻吸弃上清。向EP管中加入75%酒精洗涤沉淀，帮助分离剩余的有机试剂（剩余有机试剂过多会影响OD值和PCR反应），轻弹沉淀，使其浮在酒精，静置1-2min，让酒精充分接触沉淀，充分溶解有机试剂，然后4度离心5min。轻轻吸弃上清。将EP管再次放于离心机中瞬时离心，弃掉管壁残余液体。然后将EP管置于超净台中干燥5-10min.。注意RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。加入50ulDEPC处理水，震荡充分溶解沉淀。测量RNA浓度。将RNA保存于-80度。RNA提取试剂注意事项：溶液需用DEPC水配制。苏州正规RNA提取试剂厂家现货
这种情况下，可以在裂解缓冲液中立即进行溶解。苏州正规RNA提取试剂厂家现货
新型土壤总RNA快速提取试剂盒：独特裂解剂/裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于玻璃奶，然后将粗纯化的玻璃奶转移到离心柱，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,漂洗液将腐植酸、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的洗脱缓冲液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。兼容性强，适用于各种不同的土壤、粪便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9以上，可直接用于PCR，Northern-blot和各种酶切反应。苏州正规RNA提取试剂厂家现货
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