当前位置: 首页 » 供应网 » 化工 » 化学试剂 » 其他化学试剂 » 苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐 苏州君欣生物科技供应

苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐 苏州君欣生物科技供应

单价: 面议
所在地: 江苏省
***更新: 2023-11-03 02:01:22
浏览次数: 0次
询价
公司基本资料信息
 
相关产品:
 
产品详细说明

细胞转染方法:1.脂质体转染法阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞,苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室较方便的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性,所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等2.电穿孔转染法电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或几乎无法转入时建议用电穿孔法转染,苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐。一般情况下,高电场强度会杀死50%-70%的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂,苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐,可以较大的降低细胞的死亡率,同时提高电穿孔转染效率直到外源基因在细胞分裂过程中因各种因素丢失为止。苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐

苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐,细胞高效转染试剂

细胞电转染实验的几点建议:1.电场强度要合适合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的较佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的较佳电场强度。2.细胞状态要好用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2d)。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛,表面结构致密比稳定期的细胞差,电转后,细胞膜的恢复能力强,而且处于有丝分裂期的细胞更容易接受外源DNA苏州细胞高效转染试剂厂家现货转染试剂的准备①将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。

苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐,细胞高效转染试剂

细胞转染:(1)转染试剂的准备A.将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡,。(2)选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。(3)将混合液在室温放置10—15分钟。(4)吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。(5)加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。(6)到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。

细胞转染常用步骤:1.转染试剂的准备①将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。②震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。2.选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。3.将混合液在室温放置10―15分钟。4.吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。5.加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。6.到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时因为DNA摄入效率和表达水平在不同实验中差异较大,实验必须很小心。

苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐,细胞高效转染试剂

细胞转染简介:转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种细菌介导的转染技术。震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。苏州细胞高效转染试剂平均价格

到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液。苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐

细胞转染的注意事项:物品(PS)物品,比如青霉素和链霉素,是影响转染的培养基添加物。这些物品一般对于真核细胞无毒,但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使物品可以进入细胞。这降低了细胞的活性,导致转染效率低。所以,在转染培养基中不能使用物品,甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用物品。这样,在转染前也不必润洗细胞。对于稳定转染,不要在选择性培养基中使用青霉素和链霉素,ICIN选择性物品的竞争性克制剂。另外,为了保证无血清培养基中细胞的健康生长,使用比含血清培养基更少的物品量~苏州正规细胞高效转染试剂厂家推荐

文章来源地址: http://huagong.chanpin818.com/hxsj/qthxsj/deta_19398657.html

免责声明: 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息,均来源于其对应的用户,本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题,请及时与本网联系,我们将核实后进行删除,本网站对此声明具有最终解释权。

 
本企业其它产品
 
热门产品推荐


 
 

按字母分类 : A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z

首页 | 供应网 | 展会网 | 资讯网 | 企业名录 | 网站地图 | 服务条款 

无锡据风网络科技有限公司 苏ICP备16062041号-8

内容审核:如需入驻本平台,或加快内容审核,可发送邮箱至: