[VIP第1年] 指数:3
酶联免疫吸附筛查法是以抗原与抗体的特异性反应、酶与底物的特异性反应为基础，借助酶促反应的放大作用，提高反应的灵敏度来进行检测某一特定物质，具有特异性强、灵敏度高等特点。但复杂的基质样品可使测定结果受到干扰，测定所用过氧化酶的活性易受到样品中脂肪、pH值变化、金属离子的影响，使酶的反应活度下降，在加入底物后，显色偏浅，从而造成结果的假阳性或假阴性。所以该方法适用于大批量样品的快速筛查，对于特殊样品要进行基体加标试验，提高结果的准确度，必要时可用仪器法进行验证。
黄曲霉m1检测试剂盒酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
1编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。
3洗涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350µl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，***一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破）。
4显色：每孔加入底物液A50µl，再加底物液B50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。
5终止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。
6测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。
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