[VIP第1年] 指数:3
所需仪器：
-86℃超低温冰箱
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
所需试剂：
胎牛血清（FBS）
细胞培养级 DMSO
冻存液：80%FBS+**MSO
无菌 1×PBS pH=7.2
消化液：0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
异丙醇
所需耗材：
离心管（15ml、50ml）
T-25 细胞培养瓶
一次性无菌移液管（2ml、5ml、10ml）
8ml 冻存管
程序降温盒
操作步骤：
将需要那冻存的细胞从 CO2培养箱中取出，在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，
吸弃瓶内的培养基；
向培养内加入无菌 1×PBS 3ml，之后水平放置培养瓶，云南低温冻存盒厂家，云南低温冻存盒厂家，旋转震荡培养瓶，使 PBS
能够浸润到培养平面上所都的面积，吸弃 PBS；
重复步骤 2 一次，之后向瓶内加入消化液 1ml，云南低温冻存盒厂家，轻微震荡后放入 37℃CO2培养
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推荐的，所述冻存盒盖连接块与连接卡槽相互咬合连接。
推荐的，所述冻存盒本体为酚醛泡沫材料。
推荐的，所述冻存管摆放架由相同形状大小的摆放架、第二摆放架、第三摆放架和第四摆放架组合而成。
推荐的，所述导向柱的上端面与冻存盒本体的上端面为同一水平面，且导向柱关于冻存盒本体的轴线对称设置有4个。
推荐的，所述分隔板对称设置有2个，且分隔板的两端与分隔板固定卡槽为嵌入式安装结构。
推荐的，所述冻存区、第二冻存区和第三冻存区上的冻存管插孔的孔径大小均不相同。
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经验4：应该不可以把冻存盒放4°的，因为梯度降温的起始点是室温20°左右，所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次，而且保证液体量达到刻度线，否则降温效果会受到影响。经验5：冻存盒里的异丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理论上是5次以后更换异丙醇，但是异丙醇对环境有害，我们可以多用几次，只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO 对细胞0性，尤其是室温的时候，所以冻存盒和冻存液先放4°，等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里，还放回4°，等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。
进一步的，冻存盒体2和冻存盒盖3均为圆柱形结构，冻存盒体2的直径尺寸与冻存盒盖3的直径尺寸相配合。
进一步的，凹槽101结构、第二凹槽201结构和第三凹槽301结构均为柱形槽结构；凹槽101的开口直径尺寸与冻存盒体2的外径尺寸相配合；第二凹槽201的开口直径尺寸与第三凹槽301的开口直径尺寸相配合。
进一步的，保温层5结构为棉花材质材料板。
进一步的，支撑冻存架4为泡沫材质的架板；支撑冻存架4为圆柱型结构架板。
下面为本实用新型的具体实施例：
支撑冻存架4装配在冻存盒体2的第二凹槽201内，冻存盒盖3装配在冻存盒体2开设第二凹槽201的端面上，第二凹槽201与第三凹槽301相连通，保温层5装配在第二凹槽201和第三凹槽301内，冻存盒体2装配在底座支撑板1的凹槽101内。
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冻存细胞时要缓慢冷冻，细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻时，细胞内外的水分都会很快形成冰晶，冰晶的形成会给细胞带来很大的损伤，即使在有保护剂的条件下，温度过快的下降也会对细胞有一定的损伤，所以要程序降温，以提高细胞的存活。目前人们冻细胞多的还是将要冻存的细胞放四度，负二十度，负八十度，第二天转入液氮这样一个过程，程序复杂，中间过程稍有不慎就会影响冻存效果。技术实现要素：有鉴于现有技术的上述缺点，本实用新型所要解决的技术问题是提供一种程序降温盒，以解决现有技术的不足。为实现上述目的，本实用新型提供了一种程序降温盒，其特征在于：包括降温盒主体、盒盖、冻存管架，所述降温盒主体内壁固定一层保温棉，所述冻存管架装在降温盒主体上部，所述降温盒主体与冻存管架之间有中空层。杭州科默斯科技有限公司专业进取，尊爱至诚，锲而不舍。云南低温冻存盒厂家
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品名：梯度降温盒 、程序降温盒、细胞冻存盒货号：美国Nalgene程序降温盒5100-0001用途：细胞冻存、细胞复苏产品规格：18孔可放冻存管：1ml、1.2ml、1.5ml、2ml冻存盒尺寸：高度86mm，直接117mm易于使用，只需要***异丙醇和机械冷冻设备本产品采用聚碳酸脂（PC）盒体，蓝色高密度聚乙烯（HDPE）盖，白色高密度聚乙烯（HDPE）管槽，泡沫衬垫。可实现每分钟1℃降温，提高冻存细胞的存活率，从冰箱拿出来后，泡沫内衬及异丙醇也可保证逐步升温，故也可用于细胞复苏。用之前在盒夹层内注入***浓度的异丙醇，管槽可放置1-2ml冻存管或储液管18个，同时管槽支架可防止管子与酒精接触，以防由于毛细作用而造成污染，或弄掉标签。细胞冻存有两种方法：传统的方法是利用冷存管处于4℃、 -20℃、 -80℃保存，程序降温方法是利用程序降温盒设定程序由室温降低至-80℃，后再放置到液氮槽中长期保存。云南低温冻存盒厂家
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