[VIP第1年] 指数:3
CIN-1培养基基础是一种用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性培养基。其配方包含胰蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、氯化钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、琼脂、Irgasan、中性红、结晶紫和氯化锶等成分，pH值约为7.5±0.1（25℃）。这种培养基通过其成分的选择性作用，可以有效地促进目标菌的生长，同时抑制其他非目标菌。**CIN-1培养基基础的用途**：主要用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌（GB标准）。**添加剂**：每瓶需配套添加CIN-1添加剂，每200mlCIN-1培养基基础添加1支HB0269-2。**配制方法**：称取58.0gCIN-1培养基基础，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200ml，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃左右时，加入一支过滤除菌的CIN-1添加剂（含头孢菌素3mg，新生霉素0.5mg），混匀，倾入无菌平皿。**检验原理**：胰蛋白胨和酵母浸粉提供菌体生长所需要的氮源、碳源和微量元素；甘露醇作为可发酵碳源；氯化钠维持培养基体系渗透压；硫酸镁提供菌体生长的微量元素；去氧胆酸钠和结晶紫能够抑制革兰氏阳性菌；中性红作为酸碱指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。马铃薯浸出液作为一种常见的植物提取物，具有丰富的碳水化合物、氮源和微量元素，是一种潜在的培养基成分。结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)平板
细菌固体分离培养基是用于分离和培养细菌的固体培养基，通常包含琼脂作为凝固剂。这种培养基能够为细菌提供稳定的生长环境，并有助于观察微生物的菌落特征。以下是细菌固体分离培养基的一些关键特点：1.**成分**：细菌固体分离培养基通常包含蛋白质来源（如蛋白胨）、碳源（如葡萄糖）、无机盐（如氯化钠）和琼脂等。2.**pH值**：培养基的pH值对细菌的生长至关重要，通常需要调节至适宜的pH值，如7.3±0.1（25℃）。3.**灭菌**：培养基在制备过程中需要进行高压灭菌，通常是121℃灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟。4.**用途**：主要用于细菌的分离、计数和鉴定。通过稀释倒平板法、涂布平板法或平板划线法等技术，可以从混合的微生物群体中分离出单一的细菌菌落。5.**保存**：培养基通常在室温、避光、干燥的条件下保存。6.**操作**：在无菌条件下操作，避免污染。使用时，将培养基加热至液态，然后倒入无菌培养皿中，冷却凝固后即可用于接种细菌。7.**菌落特征**：不同种类的细菌在固体培养基上形成的菌落具有特定的形态特征，如大小、形状、颜色、边缘等，这些特征可以用于细菌的鉴定。硫酸亚铁琼脂平板去氧胆酸是一种抑制肠道细菌生长的化合物，因此对于从非肠道来源中分离出的微生物具有选择性。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下：1.**准备工作**：-确保实验室无菌操作条件，穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**：-按照培养基包装上的说明，称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中，通常为100mL。-将混合物加热至沸腾，以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**：-将溶解好的培养基冷却至50℃左右（避免过热，以免杀死细菌），此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中，一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固，形成固体培养基平板。4.**接种样品**：-使用无菌操作，将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**：-将接种后的平板倒置，放入恒温培养箱中。-根据实验要求，通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**：-培养结束后，观察平板上的生长情况，记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落，如蓝绿色或黄色菌落，这些可能是目标弧菌。
TGE肉汤（TryptoneGlucoseExtractBroth），又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉汤，是一种用于微生物培养的液体培养基。这种培养基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖，以及作为指示剂的TTC（三苯基四氮唑氯化物）。TGE肉汤（含TTC）的主要用途和特点如下：1.**用途**：TGE肉汤主要用于水、牛奶和乳制品中异养细菌的计数。它适用于细菌总数的测定，也可用于检测乳品中的耐热细菌。2.**成分**：典型的TGE肉汤配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子，葡萄糖作为可发酵的糖类提供能量。3.**pH值**：TGE肉汤的pH值通常调节在7.0±0.2（25℃）。4.**制备方法**：将TGE肉汤的干粉溶解在蒸馏水中，加热煮沸以帮助成分溶解，然后进行高压灭菌。5.**使用**：通常取一定量的培养基加热溶解于蒸馏水中，分装后进行高压灭菌，然后用于微生物的培养。6.**指示剂**：TTC作为指示剂，当细菌代谢时，TTC会被还原成红色的三苯基甲烷，从而便于观察细菌的生长情况。7.**保存条件**：未开封的TGE肉汤通常在室温下避光保存，开封后应旋紧瓶盖，避免吸潮结块，并根据存放条件适当延长保存期。
TYCSB培养基基础（TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumBase）是一种用于分离和培养特定细菌的选择性培养基。它的特点包括：1.**成分**：包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸盐酸盐、亚硫酸钠、氯化钠、无水磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等，琼脂作为凝固剂。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.3±0.2（25℃），为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**：添加的杆菌肽（Bacitracin）可以抑制革兰氏阴性菌的生长，有助于选择性地分离革兰氏阳性菌，特别是链球菌和肠球菌。4.**应用**：主要用于变异链球菌（Streptococcusmutans）的分离和培养，也适用于其他链球菌和肠球菌的分离。5.**配制方法**：通常称取培养基粉末，加入到一定量的蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，分装后进行高压灭菌。6.**质量控制**：通过使用特定的质控菌株进行测试，确保培养基支持目标菌株的生长，同时抑制非目标菌株。7.**储存条件**：未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处，配制好的培养基应保存在2-8°C。8.**结果观察**：在TYCSB培养基上，可以观察到细菌的生长情况，用于进一步的鉴定和分析。VRBA中的溴青紫红是一种指示剂，具有抑菌和变色作用。YEBA预装培养皿
通过进一步的生化测试，如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等，来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)平板
胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）是一种常用的微生物固体培养基，广泛应用于各种细菌的分离和培养。以下是TSA培养基的一些关键特点：1.**成分**：TSA培养基的主要成分包括胰蛋白胨（Tryptone，15g/L）、大豆胨（Soytone，5g/L）、氯化钠（5g/L）和琼脂（15g/L），这些成分为细菌提供氮源、维生素、生长因子以及维持渗透压和凝固培养基。2.**pH值**：TSA培养基的pH值通常调节在7.3±0.2（25℃），以满足大多数细菌生长的需要。3.**用途**：TSA培养基适用于多种细菌的培养，包括非选择性增菌培养及用于阪崎肠杆菌的纯化培养和产黄色素试验。4.**制备方法**：将TSA培养基的干粉加入到蒸馏水中，加热搅拌至完全溶解，通常分装到试管或平皿中，经过高压灭菌后备用。5.**保存条件**：未开封的TSA培养基通常在室温下避光保存，保质期可达三年。开封后应旋紧瓶盖，避免吸潮结块，并根据存放条件适当延长保存期。6.**注意事项**：在称量和操作过程中应注意无菌操作，避免微生物污染。使用后应立即旋紧瓶盖，防止吸潮。粉尘可能引起呼吸道不适，操作时应佩戴口罩。7.**应用**：TSA培养基在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广泛应用。结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)平板
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