[VIP第1年] 指数:3
牛津琼脂（OXA）基础是一种用于分离培养李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等，pH值控制在7.0±0.2（25℃）。**特点**：1.**选择性**：含有氯化锂和抗生物质添加剂（如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素），这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长，特别是非李斯特氏菌。2.**应用**：主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养，符合ISO和SN标准。3.**配制方法**：通常称取5.85g的OXA基础粉末，溶解在100mL蒸馏水中，高压灭菌15分钟后冷却至50℃，再加入配套的添加剂，混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**：李斯特氏菌在OXA培养基上生长时，会形成黑色菌落，并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性，是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。某些细菌能产生尿素酶，将尿素分解产生氨，使培养基变为碱性，酚红指示剂在pH升高时变色（通常为粉红色）。TSA0.25%青霉素酶平板
胰酪胨大豆羊血琼脂（TSSB）基础是一种用于微生物学实验的培养基，主要用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试实验。以下是它的一些主要特点：1.**成分**：TSSB基础的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化钠、无水磷酸氢二钾、葡萄糖和琼脂等。具体成分为每升培养基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化钠5.0克、无水磷酸氢二钾2.5克、葡萄糖2.5克和琼脂12.0克。2.**pH值**：该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2（25℃）。3.**灭菌处理**：制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**：每瓶需配套添加脱纤维羊血使用，以提供红细胞，检测微生物溶血特性。5.**检验原理**：胰酪胨、植物蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需的碳源、氮源、维生素及矿质元素等；无水磷酸二氢钠作为pH缓冲体系；琼脂作为凝固剂；脱纤维羊血提供红细胞，检测微生物溶血特性。6.**用法**：称取本品42.0g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装，每瓶100ml，121℃高压灭菌15分钟，冷至45－50℃时，加入5-10ml无菌脱纤维羊血，混匀后倾注平板，备用。7.**质量控制和典型特征**：在30-32℃培养18-24小时，蜡样芽孢杆菌典型特征为在菌落周围呈现β型完全溶血的溶血环。M17琼脂平板普通肉汤培养基通常由蛋白胨、牛肉浸粉（或牛肉膏粉）、氯化钠和水组成，这些成分为细菌提供必需的碳源等。
TYC培养基（TryptoneYeastCystineMedium）是一种用于分离口腔中链球菌（Streptococcusspp）的选择性培养基。它的特点包括：1.**成分**：TYC培养基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分，琼脂作为凝固剂。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.3±0.2（25℃），为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**：TYC培养基用于血链球菌的分离，可以添加杆菌肽（0.2U/ml）以增加选择性；也用于制备变形链球菌分离培养基。4.**配制方法**：称取本品98.0g于1L蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，分装后在121℃高压下灭菌15分钟，灭菌结束后摇匀，以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.**质量控制**：通过使用特定的质控菌株进行测试，可以确保培养基支持目标菌株的生长。6.**储存条件**：未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处。7.**结果观察**：在TYC培养基上，可以观察到细菌的生长情况，用于进一步的鉴定和分析。TYC培养基因其高选择性和特异性，是检测口腔中链球菌污染的重要工具。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下：1.**准备工作**：-确保实验室无菌操作条件，穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**：-按照培养基包装上的说明，称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中，通常为100mL。-将混合物加热至沸腾，以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**：-将溶解好的培养基冷却至50℃左右（避免过热，以免杀死细菌），此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中，一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固，形成固体培养基平板。4.**接种样品**：-使用无菌操作，将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**：-将接种后的平板倒置，放入恒温培养箱中。-根据实验要求，通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**：-培养结束后，观察平板上的生长情况，记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落，如蓝绿色或黄色菌落，这些可能是目标弧菌。
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基，尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点：1.**成分**：酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中，酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂，牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素，氯化钠维持渗透压平衡，磷酸氢二钾作为缓冲剂，琼脂作为凝固剂，溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**：该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1（25℃），以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**：制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟，以确保无菌。4.**使用方法**：称取一定量的培养基粉末，加入到1升蒸馏水中，加热至完全溶解，然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中，待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**：在酪蛋白琼脂上，蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶，分解酪蛋白，使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时，溴百里香酚兰的颜色变化（由绿变蓝）也有助于观察结果。6.**质量控制**：通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。CAS培养基包含铬天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化铵、铁离子等成分，这些成分与微生物分泌的铁载体反应。强化梭菌鉴别琼脂平板
蜡样芽孢杆菌在木糖明胶培养基中不发酵木糖，培养基颜色不变，液化明胶作为典型特征 。TSA0.25%青霉素酶平板
四号琼脂基础（No.4AgarBase）是一种用于微生物培养的培养基，主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些主要特点和使用方法：1.**成分**：-蛋白胨：20.0g/L-牛肉浸粉：5.0g/L-氯化钠：5.0g/L-无水亚硫酸钠：3.0g/L-十二烷基硫酸钠：0.5g/L-猪胆粉：5.0g/L-利凡诺：0.03g/L-庆大霉素：500U/L-琼脂：15.0g/L-pH值：8.5±0.2（25℃）2.**检验原理**：-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；-氯化钠维持均衡的渗透压；-亚硫酸钠可刺激弧菌生长；-十二烷基硫酸钠、猪胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌；-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH值可增强其生长；-琼脂是培养基的凝固剂。3.**配制方法**：-称取53.5g干粉培养基，加入1L蒸馏水或去离子水，加热煮沸充分溶解，冷却至50℃左右，每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾)，摇匀立即倾注平皿。4.**使用方法**：-从冷藏柜中取出平板皿，并恢复至室温。-将包装整体送入试验地点。-试验或接种。-将平板从洁净室取出，按规定的温度和时间倒置培养。-观察、计数。TSA0.25%青霉素酶平板
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