酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起,奶油色,边缘整齐光滑的菌落 。BGS琼脂平板
DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)是一种用于微生物培养的培养基,其特点和使用方法如下:1.**用途**:DTA培养基主要用于嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:该培养基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分比例为胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、琼脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**配制方法**:称取30.0gDTA培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。6.**使用方法**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。7.**结果观察**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。8.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。小牛浸液琼脂平板在DCR培养基中,添加不同的植物素,如2,4-D、6-BA、KT等,可以调节植物细胞的生长和分化。
脑心浸出液肉汤(BHI/BHIB)是一种微生物培养基,特别适用于培养营养要求较高的细菌。以下是BHI培养基的一些关键特点:1.**配方组成**:-蛋白胨:10.0g-脱水小牛脑浸粉:12.5g-脱水牛心浸粉:5.0g-氯化钠:5.0g-葡萄糖:2.0g-磷酸氢二钠:2.5g-pH值:7.4±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取38.5gBHI培养基粉末,加入1000ml蒸馏水。-加热搅拌至完全溶解,通常在121℃下高压灭菌15分钟。3.**用途**:-用于培养各种苛养型致病微生物,如链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌。-用于培养单增李斯特菌,可极大的增加李斯特菌培养时的OD值。-加入腹水后,可用于淋球菌的培养。-用于葡萄球菌的血浆凝固酶试验。-作为检测培养基,用于检测水、废水、肉类和食品。-作为药敏实验的接种用培养基。-可用来配制血液培养基。4.**培养条件**:-通常在36℃±1℃的条件下培养。5.**保存条件**:-2-8°C保存。6.**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。-使用前请检查平板内是否干裂或染菌,若长菌请勿使用。-4°C储存的平板出现冷凝水属正常现象,请在洁净环境下将水倒出后使用。-请在洁净环境下操作,开封后请尽快使用,避免杂菌干扰。
酚红葡萄糖肉汤(PhenolRedGlucoseBroth)是一种常用的微生物学培养基,主要用于鉴定细菌是否具有发酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酚红葡萄糖肉汤的配方包含月示胨(或称为蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持渗透压;酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌10-15分钟。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装试管,每管3ml。5.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在厌氧条件下35℃培养24小时,培养基由红色变为黄色,表明细菌发酵葡萄糖产酸。6.**用途**:酚红葡萄糖肉汤用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准),也用于检测大肠菌群。7.**结果观察**:如果培养基颜色由红色变为黄色,说明细菌发酵葡萄糖产酸;如果培养基颜色不变或红色加深,说明该微生物葡萄糖发酵阴性。8.**储存条件**:避光,密封,阴凉干燥处保存。木糖明胶培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸粉、明胶、木糖、磷酸氢二钠和酚红等。
变异链球菌(Streptococcusmutans)是一种在口腔中发现的细菌,与龋齿的形成有关。它是一种革兰阳性球菌,常以成对或短链状排列。在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。对于变异链球菌的培养,通常使用TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板)作为培养基。在这种培养基上,变异链球菌的菌落特征为较小(直径约1mm)、灰白色、凸起、边缘不齐、干燥、有α溶血环。在选择培养基时,需要考虑培养基的pH值、营养成分、氧气需求和抑制剂等因素,以确保目标细菌能够在抑制杂菌的同时良好生长。例如,改良爱德华培养基(Edwardmodifiedmedium)是一种常用的培养基,它含有血液、血清或其它营养成分,适合于培养对营养要求较高的细菌,如链球菌。在实验室中,变异链球菌的培养和鉴定是一个多步骤的过程,包括接种、培养、观察菌落特征、进行生化试验和药敏分析等。通过这些步骤,可以准确地识别和鉴定变异链球菌,从而为临床诊断提供依据。尽管哥伦比亚血琼脂基础有许多优点,但也存在一定的局限性,如对嗜血杆菌生长的抑制以及受血液类型的影响。溴甲酚紫琼脂(糖发酵)预装培养皿
克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。BGS琼脂平板
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。BGS琼脂平板
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