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广东多色荧光免疫组化技术服务 欢迎来电 上海朝瑞生物科技供应

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***更新: 2020-01-19 15:38:17
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    3、四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):该荧光素能与细胞内蛋白质结合,比FITC稳定性好,在生理条件下对pH值变化不敏感,荧光强度受自发荧光干扰小。比较大激发光波长为550nm;比较大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光,与FITC发出的黄绿色荧光对比鲜明,常用于免疫荧光组织化学双重染色。4、花青类染料常用的有Cy3、Cy5等,能与细胞内蛋白质结合。这类染料的荧光特性与传统荧光素类似,但水溶性和对光稳定性较强,荧光量子产率较高,广东多色荧光免疫组化技术服务,广东多色荧光免疫组化技术服务,对pH等环境不敏感。常用于多重染色。5,广东多色荧光免疫组化技术服务、乙酸甲酯其本身不发荧光,但透膜进入细胞质后,在酯酶的作用下转变为具有荧光特性的乙酸甲酯。其激发光谱有pH依赖性,是使用**多的细胞内pH荧光指示剂。比较大激发光波长为505nm,比较大发射光波长为530nm,呈绿色荧光。

    而高离子强度则有利于分解)11)DAB显色背景的深浅和特异性染色的深浅均可以由DAB孵育条件决定。DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现特异性染色较强而本底着色较浅时即可冲洗;DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间;此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间;DAB显色时间很长(如超过十几分钟)才出现阳性染色,一方面可能说明你的抗体浓度过低或孵育时间过短(比较好一抗4℃过夜);另一方面就是封闭时间过长。12)复染目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位,经常用苏木素复染(胞核染料)。注意苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况,一般数秒-数分钟,胞浆蛋白可以适当时间长一点,而胞**白则要短。不过这个如果染色不理想可以补救的。方法是:染色深则分化时间稍长些即可;染色浅则再置于苏木素中染色即可。盐酸酒精是分化,氨水是返兰。作用不同。片子复染完后流水振洗,然后置于盐酸酒精中数秒(一定动作要快)后拿出流水振洗。

    –将抗原与抗体分别加入同一凝胶板中两个相隔一定间距的小孔内,使两者进行相互扩散,当抗原抗体浓度之比相适宜时,彼此相遇形成一白色弧状沉淀线。·优缺点:简便,但敏感性较低,易出现假阴性结果。免疫双向扩散法的操作步骤·将玻璃板用水洗净后用75%乙醇冲洗,晾干后放在水平台上备用。·将l%agar融化后,置56C水浴。·在玻璃板上铺胶,约厚,凝固后打孔(直径3rnm),孔间距10mm。·中心孔加5l抗原样品,周围孔内每孔加5l抗血清(抗体预先作系列倍比稀释即1:2、1:4、1:8、1:16、1:32等比例)。·凝胶板置湿盒内,室温扩散24h。·观察结果。抗体效价检测的其它方法·环状沉淀试验,需较多的抗血清,现已很少用;·对流免疫电泳,比琼脂免疫双扩散法敏感,较简便、实用;·酶联免疫吸附试验(ELISA)。(6)放血或定期抽血常用以下3种方法·颈动脉放血法:放血量较多,动物不易中途死亡。例如:。家兔、山羊、绵羊等动物**常用此法。·心脏**法:常用于家兔、豚鼠、大白鼠、鸡等小动物,但操作不当易引起动物死亡。·静脉**:家兔可用耳缘静脉**;山羊、绵羊、马和驴可用颈静脉**,这种放血法可隔日1次,有时可采集多量血液。(6)放血或定期抽血。

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