用于病原体检测:常规PCR不能定量,在操作中易污染导致出现假阳性结果,应用实时荧光定量PCR技术可以解决这些问题。此项技术已应用于检测丙肝***、宫颈*及其*前病变有关的人类**瘤***、抗结核******后定量检测病人痰样本病原体DNA含量,广西基因表达荧光定量PCR检测服务,为疾病的诊断和***提供依据。用此项技术还可以一次性检测大量大肠杆菌样本,广西基因表达荧光定量PCR检测服务,简便准确,广西基因表达荧光定量PCR检测服务,是食品检面的一个突破
用于***选择和疗效判断:化疗过程中主要问题是病人对化疗***的耐药,检测**耐药基因的表达水平是选择化疗***的依据。检测微小残留病变的变化情况对于调整***策略和对病人进行个体化***非常重要
在使用具有相同 ROX 水平的两种预混液的一次检测中获得的原始荧光数据。信号差异是由预混液的成分造成的。使用 Applied Biosystems™ VIC™/MGB 探针在 Applied Biosystems™ 7900HT 快速实时荧光定量 PCR 系统上执行此反应。x 轴显示荧光基团的的发射波长,y 轴显示发射强度。
任何分子的荧光发射都受环境因素的影响,比如溶液的 pH 值和盐浓度。图 2 显示某个 Applied Biosystems™ TaqMan® 探针在两种不同预混液背景下的原始荧光数据。请注意,尽管两组反应的靶标、探针和 ROX 染料浓度都相同,预混液 A 中的荧光强度更高
一个评估 PCR 效率的关键参数是 R2,它是说明如何使用一个数值预测另一个数值的相关程度的统计学术语。如果 R2 为 1,那么 Y 值 (Ct) 可以用来准确预测 X 值(图7A)。如果 R2 为 0,那么就不能通过 Y 值预测 X 值(图 7B)。R2 值 >0.99 表示两个数值之间相关的置信度良好。
精确度
标准差(偏差的平方根)是**常用的精确度计量方法。如果许多数据点都靠**均值,则标准差就小;如果许多数据点都远离平均值,则标准差就大。
实际上,足够多重复次数产生的数据**形成大致的正态分布。这经常可通过经典的中心极限定理来证明,该定理称大量**同分布随机变量的和在无限多时趋向于正态分布。如图 8A 所示,约 68% 的值在平均值的 1 个标准差之内,约 95% 的值在平均值的 2 个标准差之内,约 99.7% 的值在平均值的 3 个标准差之内。
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