医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1 蒸馏水煮沸除去 C02,逐渐加碱性 品红 2.08 溶解后,待冷却至 60℃,加 1mm01 儿 HCl40ml, 再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳 1.5g, 放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于 4℃ 冰箱中。 2.过碘酸作用液:过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中,或取 过碘酸钾(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml,微加热使溶 解,再加浓硝酸 0.3m1,置冰箱中保存。 3.固定液:95%乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混匀。 4.20g/l 甲基绿:甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。 [操作] _x000c_(1) 新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟,湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格。 (2) 水洗数次后,湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格,对照片先用唾液消化 30 分钟,也可在 同一片,湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做 测定。 (3) 水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用 10 分钟后, 再水洗数次。如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病。湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格
糖原染色法:染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤:1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加过碘酸溶液,氧化5min;3.蒸馏水洗10min;4.滴加Schiff试剂,侵染10-20min;5.倾去Schiff 试剂,流水冲洗10min;6.滴加苏木素染色液,染核1-2min;7.流水冲洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。
糖原染色 用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性。
PAS染色的临床意义:1.红细胞系统:①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应,有时阳性反应幼红细胞的百分比增高,阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血)以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应,有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时,幼红细胞为阴性反应,有时*个别幼红细胞呈阳性反应。主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:Schiff氏染液的配制是关键,尤其是偏重亚硫酸钠的质量,打开应是粉剂,且带有硫的气味,若成团或没有气味,则不能用,配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现,冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之间),环境温度以不高于20℃为宜,室温高时氧化时间适当缩短;如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长,可使某些物质成分发生非特异反应,使染色结果出现假阳性。因此,室温较高时可适当缩短反应时间。该依据切片厚薄、组织的类别等决定。江苏品质好的糖原染色试剂盒量大从优
素染色液100mlHE染色属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种。湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病 该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。湖南如何使用糖原染色试剂盒平均价格
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