[VIP第1年] 指数:3
T7EndonucleaseI（T7EI）是一种特殊的DNA内切酶，具有以下特点：1.**识别错配DNA**：T7EI能够识别并切割不完全配对的DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。2.**切割位点**：T7EI切割错配位点5'端的、第二或第三个磷酸二酯键。3.**灵敏度**：T7EI对错配DNA的识别非常灵敏，能够检测并切割单碱基和多碱基的错配。4.**应用**：T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因编辑技术导致的基因突变的鉴定。它通过识别错配DNA来帮助鉴定基因编辑是否成功以及是否有非目标效应。5.**直接电泳检测**：T7EI的产物可以直接通过电泳进行检测，这使得它在实验操作中更为方便。6.**来源**：T7EI来源于大肠杆菌菌株，是一种麦芽糖结合蛋白（MBP）和T7核酸内切酶I（T7EI）的融合蛋白。7.**成本效益**：尽管T7EI在商业上使用时成本较高，但它在大规模样本测试中，尤其是在基因突变鉴定方面，提供了一种有效的筛选方法。8.**特殊注意事项**：T7EI能够识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA，但不能识别1bp的插入、缺失或突变。这些特点使得T7EndonucleaseI成为基因突变鉴定中一个非常有用的工具，尤其是在CRISPR/Cas9等基因编辑技术的应用中。T4 DNA 聚合酶相对不耐热，在 70℃加热 10 分钟可使 T4 DNA 聚合酶失活，因此在实验操作过程中需要注意温度。Recombinant Rat IL-9
一、强大的耐受性和兼容性Plant Direct PCR Master Mix (2×)(Without Dye) 使用了经过定向进化改造的DNA聚合酶，这种酶对植物样本中的多糖、多酚等PCR抑制物具有极强的耐受性。即使在样本经过简单裂解后，也能高效地进行DNA扩增，适用于多种植物物种，包括拟南芥、小麦、水稻和玉米等。此外，该预混液的扩增性能好，能够扩增长达5 kb的DNA片段，适用于各种植物样本的直接扩增。二、快速便捷的操作流程该预混液为2倍浓度的反应体系，包含DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺和优化的缓冲体系，只需加入模板和引物即可进行反应。其独特的裂解缓冲液能够在短时间内裂解植物组织，释放出可用于PCR的基因组DNA。这种“直接扩增”的方式不仅节省了时间，还减少了因DNA提取过程中的损失和污染。三、稳定性和重复性Plant Direct PCR Master Mix (2×)(Without Dye) 经过严格的质量控制，即使在反复冻融50次后，活性仍保持稳定。其优化的配方和稳定的酶体系确保了实验结果的高度重复性，适合高通量筛选和大规模样本分析。Rabies Virus GlycoproteinPhusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶，这是一种具有高保真性的热稳定酶它能够以准确性复制DNA模板。
在PCR产物的克隆中，Lambda核酸外切酶（λExonuclease）有其特定的应用和优势，但它不能完全替代其他酶。以下是一些替代酶和它们的特点：1.**ExonucleaseIII（ExoIII）**：-ExoIII具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性，尤其适合双链DNA的平末端、5'-突出末端或切口，从DNA链的3'-端释放5'-单磷酸核苷酸，产生单链DNA片段。-与Lambda核酸外切酶相比，ExoIII对具有3'-突出末端的DNA有活性，而Lambda核酸外切酶则对5'-磷酸化的双链DNA有更高的活性。2.**TaqDNA聚合酶**：-在平端克隆中，可以使用TaqDNA聚合酶和dATP进行“3'dA加尾”，以提高连接效率。-这种方法通过在PCR产物的3'端添加突出的腺嘌呤（dA），增加了与载体连接的可能性，从而提高克隆效率。3.**TOPO克隆载体**：-TOPO克隆载体含有共价连接的DNA拓扑异构酶I，可同时作为限制性内切酶和连接酶。-与传统PCR克隆载体相比，TOPO克隆载体具有更短的连接反应时间、更高的克隆效率以及更简单的分子克隆实验方案。综上所述，虽然Lambda核酸外切酶在特定情况下非常有用，但它不能完全替代其他酶。每种酶都有其独特的特性和应用场景，选择合适的酶取决于具体的克隆需求和实验设计。
Pfu DNA Polymerase：高保真PCR的选择Pfu DNA Polymerase（Pfu酶）是一种源自嗜热菌 Pyrococcus furiosus 的高保真DNA聚合酶，因其性能和广泛的应用而备受科研工作者青睐。产品特点Pfu DNA Polymerase具有高度的热稳定性和保真性。其分子量为90 kDa，具备5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性，能够在PCR扩增过程中纠正错误掺入的碱基，降低错误率。与传统的Taq DNA聚合酶相比，Pfu酶的保真性高出8倍以上，错误率为1.3×10⁻⁶。此外，Pfu酶在95°C孵育1小时后仍能保持90%以上的活性。性能优势Pfu DNA Polymerase在扩增效率和速度上也表现出色。其扩增速度可达4 kb/min，是普通Pfu酶的8倍。这种高效的扩增能力使其能够快速、准确地扩增长片段DNA，可扩增长度达10 kb。同时，Pfu酶对低浓度模板的检测灵敏度极高，即使在1 pg的模板量下也能有效扩增。将含有重组质粒的表达载体转化到宿主细胞中，通常是大肠杆菌或其他合适的细胞系。
产品特点50× ROX Reference Dye的主要成分是高纯度的5-ROX甘氨酸，其浓度为25 µM，以50倍浓缩的形式提供。这种染料的荧光强度在PCR过程中保持稳定，不会因扩增反应而发生变化，因此可以作为理想的内部参考信号。其激发波长为575 nm，发射波长为602 nm，与多数qPCR仪器的光学系统兼容。此外，ROX Reference Dye具有良好的化学稳定性，能够在-20℃避光保存长达2年，短期使用时可在4℃保存。这种稳定性使其在实验中能够提供一致的荧光信号，减少因试剂变质导致的实验误差。性能优势校正孔间误差：qPCR实验中，由于加样量、孔位置、试管壁厚度等因素，不同孔之间的荧光信号可能存在差异。50× ROX Reference Dye能够通过校正这些非PCR相关的变化，显著提高定量的精确度。提高数据重现性：通过使用ROX染料对数据进行归一化处理，实验人员可以在较少的重复实验中获得更精确的结果，从而节省时间和资源。适用于多种仪器：50× ROX Reference Dye兼容多种主流qPCR仪器，如ABI 5700、7000、通过优化crRNA的设计，可以提高FnCas12a的特异性和灵敏度，例如在microRNA检测中 。Recombinant Rat IL-9
Cas12a还可以高效地在一些重要的工业链霉菌菌株中产生编辑，这些菌株由于毒性而不能使用SpCas9进行编辑。Recombinant Rat IL-9
牛痘DNA拓扑异构酶I（VacciniaVirusDNATopoisomeraseI）是一种来源于牛痘病毒的I型真核拓扑异构酶，具有以下功能和应用：1.**功能**：-牛痘DNA拓扑异构酶I可以催化双链DNA分子中单链DNA特定序列位置的磷酸二酯键的断开和连接。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性，能够通过快速的酶切和连接使双链共价闭合环状的正或负超螺旋DNA发生解超螺旋，形成含有较少的正或负超螺旋的双链环状DNA分子。-能够使双链DNA形成绳结(knotting)或解开绳结(unknotting)，联结互补的单链环状DNA成为双链环状DNA。2.**应用**：-作为一种DNA重组连接的新型工具酶，用于DNA载体和重组片段的连接、缺刻修复、接头连接等。-适用于TOPO克隆载体的制备、NGS建库中的接头连接等。-在TOPO克隆技术中，DNA拓扑异构酶I同时具有限制酶和连接酶特性，其生物学功能是在复制期间切割并重新连接DNA。3.**使用方法**：-用于DNA快速酶切流程，包括配制体系反应液、轻柔混匀、37℃孵育15分钟等步骤。4.**储存条件**：-建议在-25～-15℃保存，有效期为3年。5.**注意事项**：-避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止酶失活。牛痘DNA拓扑异构酶I因其独特的功能，在分子生物学研究和基因工程中扮演着重要的角色。Recombinant Rat IL-9
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